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">Newsnet 2022-09-25 00:54
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    产品详情
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    • 产品型号:PR107450
    • 产品厂商:派瑞曼
    • 产品文档:
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    简单介绍:
    PDPN大鼠平足蛋白elisa试剂盒说明书售后:我公司具有上等的技术团队,产品一旦售出,实验过程中遇到困难可提供在线技术咨询。使您使用PDPN大鼠平足蛋白elisa试剂盒说明书时没有任何的后顾之忧。
    详情介绍:

    优势特点:产品仅用于科研
    1.高效、灵敏、特异的抗体
    2.稳定的重复性和可靠性;
    3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相载体;
    4.使用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养液、尿液、唾液等等多种标本类型;
    5.节省实验经费。 

    服务:
          我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。

    产品名称

    英文名称

    货号

    PDPN大鼠平足蛋白elisa试剂盒说明书

    Rat Podoplanin(PDPN)ELISA Kit

    PR107450

    组成及试剂配制 :
    1. 酶联板:一块(96孔) 
    2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
    如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
    3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
    4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
    5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
    6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
    7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
    8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 
    9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
    10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

    样本实验前准备:
    elISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
    (1)血清
    室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
    (2)血浆:
    应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
    (3)尿液:
    用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
    (4)细胞培养上清:
    检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
    (5)培养细胞
    检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
    (6)组织标本
    切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
    注意事项:
    1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
    2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
    3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
    4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
    5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6. 底物请避光保存。
    7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
    8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
    9. 本试剂不同批号组分不得混用。

    操作流程:
    (1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 
    (2)酶标板置4℃,包被过夜。
    (3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
    (4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
    (5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
    (6)洗板,同(4)。 
    (7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
    (8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
    (9)洗板,同(4)。 
    (10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 
    (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
    (12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
    (13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

    121818-29-9  (±)4(5)-EpDPA methyl ester  100μg  Ovine Astrovirus 2(OAstV)绵羊星状病毒2型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒  动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 

    121818-29-9  (±)4(5)-EpDPA methyl ester  25μg  California Encephalitis Virus加利福利亚脑炎病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒  动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 

    121818-29-9  (±)4(5)-EpDPA methyl ester  50μg  Ovine Astrovirus 2(OAstV)绵羊星状病毒2型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒  动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 

    121818-29-9  (±)4(5)-EpDPA methyl ester  500μg  Ovine Astrovirus 1(OAstV)绵羊星状病毒1型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒  动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 

    121820-50-6  Desertomycin A  1mg  Ovine Astrovirus 1(OAstV)绵羊星状病毒1型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒  动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒
    1143578-94-2  TAK 21d  10mg  Neisseria meningitidis Group A脑膜炎奈瑟菌A群LAMP试剂盒  动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 

    1143578-94-2  TAK 21d  50mg  Neisseria meningitidis Group A脑膜炎奈瑟菌A群LAMP试剂盒  动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 

    114360-54-2  Fmoc-D-Leu-OH  100g  Neisseria meningitidis脑膜炎奈瑟菌LAMP试剂盒  动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 

    PDPN大鼠平足蛋白elisa试剂盒说明书114360-54-2  Fmoc-D-Leu-OH  25g  Neisseria meningitidis脑膜炎奈瑟菌LAMP试剂盒  动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 

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